Contenidos

Bloque 1. Expresión y purificación de biomoléculas

• Principios generales de la expresión heteróloga de biomoléculas.
• Estrategias de clonación para la expresión: vectores de expresión, promotores y sistemas de inducción.
• Uso de etiquetas de afinidad (tags) para la purificación y detección de proteínas.
• Criterios de selección del sistema de expresión según la aplicación biomédica.
• Limitaciones, rendimiento y calidad de las biomoléculas obtenidas.

Bloque 2. Análisis de proteínas y ácidos nucleicos mediante electroforesis e hibridación

• Fundamentos de las técnicas electroforéticas aplicadas a biomoléculas.
• SDS-PAGE y electroforesis bidimensional (2D): principio, resolución e interpretación.
• Western blot: especificidad, sensibilidad y controles.
• Southern y Northern blot: principio de hibridación, aplicaciones y limitaciones.
• Análisis crítico de patrones experimentales y fuentes de error.

Bloque 3. Interacciones moleculares

• Bases experimentales para el estudio de interacciones biomoleculares.
• Ensayos de pull-down como herramienta para el análisis de interacciones proteína–proteína y proteína–ácido nucleico.
• Controles experimentales, especificidad e interpretación de resultados.
• Limitaciones de los ensayos de interacción basados en afinidad.

Bloque 4. Amplificación y cuantificación de ácidos nucleicos

• Fundamentos de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR).
• Variantes de la PCR: qPCR y RT-qPCR.
• Diseño de ensayos, especificidad, sensibilidad y cuantificación.
• Controles, errores experimentales e interpretación de resultados en contexto biomédico.
• Aplicaciones en investigación y diagnóstico molecular.

Bloque 5. Plataformas de análisis genómico

• Plataformas basadas en hibridación: microarrays de SNP y CGH.
• Principios, aplicaciones y limitaciones de las tecnologías de arrays.
• Comparación entre estrategias basadas en hibridación y secuenciación.
• Criterios de selección de la plataforma según la pregunta biomédica.

Bloque 6. Next Generation Sequencing (NGS)

• Principios generales de la secuenciación de nueva generación (NGS).
• Tipos de aproximaciones: secuenciación dirigida, exoma y genoma completo.
• Cobertura, profundidad, sesgos y calidad de los datos.
• Tipos de variantes genéticas e interpretación a nivel conceptual.
• Aplicaciones en investigación biomédica y diagnóstico molecular.

Bloque 7. Espectrometría de masas aplicada a la biomedicina

• Principios generales de la espectrometría de masas.
• Espectrometría de masas acoplada a cromatografía líquida (LC-MS/MS).
• Identificación y cuantificación de biomoléculas.
• Conceptos de sensibilidad, especificidad y límites de detección.
• Aplicaciones biomédicas en investigación y entornos clínicos.

Bloque 8. Resonancia Magnética Nuclear (RMN)

• Fundamentos de la resonancia magnética nuclear.
• RMN aplicada a la detección y caracterización de biomoléculas.
• Introducción a la RMN como técnica de imagen.
• Información estructural y funcional proporcionada por la RMN.
• Limitaciones y alcance de la técnica.

Bloque 9. Edición genómica: CRISPR-Cas9

• Bases moleculares del sistema CRISPR-Cas9.
• Estrategias de edición genómica y tipos de modificaciones.
• Controles experimentales, especificidad y efectos fuera del objetivo (off-target).
• Aplicaciones en investigación biomédica y perspectivas terapéuticas.
• Consideraciones éticas y limitaciones técnicas.

Bloque 10. Integración de técnicas y diseño experimental

• Selección de técnicas en función de la pregunta biomédica.
• Diseño experimental y estrategias de validación.
• Tipos de controles y criterios de calidad.
• Análisis crítico e interpretación integrada de datos experimentales.
• Limitaciones metodológicas y toma de decisiones.